时间: 2025-07-26 11:31:36 来源: honorcap.krnewsserving.com 作者: 自然之美
3、高效样品前处理优化
实验室主要对自然晒干仙草进行粉碎，液相样品中含有色素等其他物质，色谱酸含而根据苯甲酸性质，串联草及微溶于水、质谱易溶于乙醇、法测乙醚等有机溶剂，定仙因此实验室采用乙醇、其产乙酸乙酯、品中乙醚、苯甲乙腈几种实验室常用有机溶剂对样品进行提取，高效苯甲酸在电离状态下在水中溶解度较大，液相因此在样品中加入盐酸酸化样品，色谱酸含并加入氯化钠，串联草及降低苯甲酸在水相中的质谱溶解度，通过液液分配，达到对仙草中苯甲酸的提取。实验结果表明：乙醚提取效果最好。
用乙醚对能力验证样品、实验室质控样，检测结果满意（见表2）。
4、线性范围，检出限、定量限、回收率和精密度
标准溶液1000mg/L，用流动相稀释得到0.00、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mg/L浓度点配制的曲线点。按（1）色谱条件。色谱柱Shim-packGIST2.0mmI．D×150mmL，2.0μm；流动相A：0.2mmol/L乙酸铵水溶液，B：乙腈，等度洗脱（A/B=70/30）；流速（0.4mL/min）；柱温：40℃。进样量10μL。（2）质谱条件离子化模式。ESI（一）；离子喷雾电压：4.5kV；雾化气：氮气3.0L/min；干燥气：氮气15L/min；碰撞气：氩气；DL温度：250℃；加热模块温度：400℃；扫描模式：多反应监测（MRM）；驻留时间：20ms；延迟时间：3ms仪器条件以优化的最佳条件进样分析，以峰面积为纵坐标、质量浓度（μg/L）为横坐标画曲线。实验结果表明，目标物在0.1～2.0mg/L范围内线性关系良好，线性方程为y=173.49x+180.85，相关系数为0.9999。本研究通过配制0.05mg/L浓度点进样11次，得到11次进样标准偏差S=0.008，3×S为检出限，4倍检出限作为定量限，称样量1.09，本方法的检出限为0.025mg/kg，定量限为0.1mg/kg。
在两种不同产地仙草样品中分别添加0.1mg/L、0.5mg/L、1.5mg/L三个水平浓度目标物标准品，每个水平重复测试6次，进行回收率和精密度计算，平均回收率在90.0％～98.0％之间，相对标准偏差在（RSD）2.1％～4.6％之间，结果见（见表3）。
5、实际样品的检测
本研究建立的方法对仙草、仙草胶粉、凉粉罐头、仙草露等样品进行测试，几种仙草及其加工产品中均检出了苯甲酸，其中苯甲酸含量：仙草在7.52mg/kg～8.33mg/kg间，仙草胶粉50.4mg/kg，凉粉罐头2.60mg/kg，仙草露1.76mg/kg，（见表4）。苯甲酸标准品和仙草样品色谱图分别见图8、图9。
三、结论
本文采用乙醚作为萃取溶剂，在酸性条件下，液液萃取法提取仙草及其产品中苯甲酸的前处理技术，建立了仙草及其产品中苯甲酸含量的HPLC—MS/MS测定方法，该方法简单、灵敏、稳定，可满足仙草及其产品中苯甲酸含量的检测和确证。
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相关链接：苯甲酸，乙酸乙酯，乙醇，乙腈，乙醚
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